Componentes dos extratos de viscum album

Os efeitos biológicos e farmacológicos dos componentes do viscum foram amplamente analisados (visão geral, ver  [174, 175]),e foi possível – em alguns casos já em meados do século passado – isolar muitos componentes farmacologicamente ativos diferentes, como lectinas de viscum (ML I, II, III) [186], viscotoxinas [187], peptídeos de Kuttan [188], oligo e polissacarídeos [189, 190, 191], lipídios [192], flavonoides [191], tióis [193], ácidos vegetais, fitoesteróis e esteróis, fenilpropanos, lignanas, alcalóides, minerais, oligoelementos e várias outras proteínas [174, 175, 194, 195, 196] e, em parte, triterpenos [192, 197]. O conteúdo dos diferentes constituintes varia dependendo da estação, do estágio de desenvolvimento da planta, da época da colheita, do habitat e da árvore hospedeira [198].

Dessa forma, os extratos de viscum contêm um grande número de constituintes diferentes com diferentes modos de ação, que só podem desenvolver seus efeitos complexos e intersistêmicos com efeitos agonísticos/antagonísticos e sinérgicos/co-estimulatórios quando usados juntos. Assim, os efeitos não podem ser reduzidos apenas aos constituintes individuais, mas somente o extrato total pode revelar seu efeito máximo.

Para levar em conta as diferenças sazonais na concentração dos vários constituintes, as preparações antroposóficas de viscum – estritamente separadas de acordo com sua árvore hospedeira – são geralmente colhidas duas vezes por ano, no solstício de verão e de inverno, e os extratos são então misturados em um processo mecânico específico.

Atualmente, a estrutura, o perfil de atividade e os modos de ação das lectinas do viscum, em particular a ML I, são os mais bem estudados. As lectinas do viscum são glicoproteínas com um teor de carboidratos de 4 a 12 por cento, dependendo da árvore hospedeira e do momento da colheita, com a característica específica de aglutinar células e reconhecer e ligar especificamente certos açúcares. Como monômeros, eles têm um peso molecular entre 50 e 63 kDa. Eles consistem em uma cadeia A tóxica (29 kDa, 254 aminoácidos) com propriedades enzimáticas e uma cadeia B de ligação a carboidratos (34 kDa, 264 aminoácidos), que são conectadas por uma ponte dissulfeto.

As três diferentes lectinas de viscum ML I, ML II e ML III podem ser identificadas por sua especificidade de açúcar e peso molecular. ML I se liga especificamente à D-galactose, ML II à D-galactose e N-acetil-galactosamina e ML III à N-acetil-galactosamina. Dentro da célula, a ponte dissulfeto que conecta as subunidades A e B é reduzida durante o transporte molecular, de modo que as duas subunidades se dissociam. A subunidade A livre da lectina do viscum se torna uma potente proteína inativadora de ribossomos no citosol, inibindo irreversivelmente a biossíntese de proteínas e, assim, iniciando a apoptose. As lectinas I, II e III do viscum pertencem, portanto, às proteínas inibidoras do ribossomo tipo 2 [175, 193, 199, 200, 201, 202, 203].

Apenas cerca de 1% das proteínas do viscum são lectinas do viscum. O conteúdo de lectina está sujeito a uma ampla gama de variações e depende particularmente da árvore hospedeira e da estação. O viscum do carvalho, do álamo (poplar tree) e da macieira são particularmente ricos em lectinas, com ML I claramente predominante. O viscum do pinheiro contém consideravelmente menos lectinas (predominantemente ML III) e quase nenhuma ML I. Além disso, o viscum contém quantidades consideravelmente maiores de lectina na planta do inverno do que no verão, que estão localizadas principalmente no centro do arbusto do viscum e no haustório [177, 204].

Embora as lectinas estejam presentes apenas em baixas concentrações nos extratos de viscum, sua atividade farmacológica é um fator importante na eficácia das preparações de viscum. Os efeitos antitumorais das lectinas do viscum já foram demonstrados na década de 1970 e foram investigados em vários experimentos in vitro desde então. Foi demonstrado que as lectinas do viscum atuam danificando diretamente as células tumorais e indiretamente estimulando processos imunológicos.

A citotoxicidade direta é baseada principalmente na inibição da síntese de proteínas e na indução de morte celular programada (apoptose). A ativação do sistema imunológico é alcançada, entre outras coisas, pelo aumento do número e da atividade das células assassinas naturais (células NK) e das células T auxiliares (células Th), liberando beta-endorfina, reduzindo a progressão e aliviando os efeitos colaterais das terapias convencionais contra o câncer. O tratamento com lectinas de viscum também demonstrou aumentar a atividade das células linfáticas, aumentar significativamente os níveis de citocinas IL-1, IL-6, IL-10, IL-12, IFN-gama e TNF-alfa no soro, aumentar a atividade de fagocitose e amplificar a explosão oxidativa. A proteção do DNA celular contra a metilação também foi observada [175, 201, 202].

Além das lectinas, as viscotoxinas representam os outros constituintes farmacologicamente importantes e típicos do viscum. São polipeptídeos de baixo peso molecular, resistentes ao calor, fortemente alcalinos, consistindo de 46 aminoácidos e tendo um peso molecular de cerca de 5 kDa. Três pontes dissulfeto são responsáveis ​​pela alta estabilidade das viscotoxinas.

Devido ao seu alto teor de cisteína, elas são classificadas no grupo das tioninas, das quais as isoformas viscotoxina A1, A2, A3, B e 1-PS são conhecidas [174, 200, 202, 204, 205, 206, 207, 208].

Como é o caso das lectinas, o teor de viscotoxina do viscum depende do tempo de colheita e do tipo de árvore hospedeira. Por exemplo, o viscum de diferentes árvores hospedeiras contém diferentes quantidades de viscotoxinas, que são encontradas principalmente em folhas muito jovens, caules e brotos curtos com flores (incluindo frutos), ou seja, na periferia da planta. O haustório não contém viscotoxinas. O conteúdo de viscotoxina é mais alto em junho. Assim, as viscotoxinas se comportam exatamente de maneira oposta às lectinas do viscum [198].

O efeito das viscotoxinas é menos pesquisado do que o das lectinas. Sabe-se que elas têm um efeito imunogênico, assim como as lectinas do viscum, e que induzem anticorpos anti-viscotoxina após exposição repetida. Um efeito citotóxico também foi demonstrado, mas, em contraste com as lectinas do viscum, esse efeito é causado pela rápida lise da membrana celular, ou seja, necrose [174, 204]. Seus efeitos tóxicos são presumivelmente causados pela ligação de tioninas aos fosfolipídios da membrana e subsequente formação de poros e danos à parede celular.

As várias viscotoxinas diferem consideravelmente em sua citotoxicidade. As viscotoxinas A3 e 1-PS têm a citotoxicidade mais forte, em contraste com a viscotoxina B, que tem apenas cerca de 1/15 do efeito citotóxico das viscotoxinas A3 e 1-PS.

As viscotoxinas também aumentam a atividade das células T citotóxicas e granulócitos (explosão respiratória, fagocitose), de modo que bactérias e provavelmente também células tumorais podem ser destruídas de forma mais eficaz. Elas inibem a síntese de RNA, DNA e proteína, aumentam a citotoxicidade mediada por células NK em relação às células tumorais e causam uma liberação de IL-6 [174, 175, 202, 209].

Os peptídeos de Kuttan são peptídeos de baixo peso molecular, estáveis ​​ao calor, com um peso molecular de cerca de 5 kDa, que exibem algumas das propriedades das viscotoxinas. As moléculas mostram efeitos citotóxicos e imunomoduladores. Em experimentos com animais, um efeito antitumoral também pode ser observado quando aplicado localmente [188].

A planta viscum também contém oligo e polissacarídeos, cujos conteúdos estão sujeitos a flutuações sazonais. Os polissacarídeos são polímeros de açúcar de alto peso molecular formados a partir de monossacarídeos aos quais as proteínas podem se ligar.

Tanto os poli quanto os oligossacarídeos contidos no viscum são substâncias imunologicamente e antitumorais ativas. Em experimentos com animais, os polissacarídeos do viscum protegeram contra danos causados ​​pela radiação e melhoraram significativamente o tempo de sobrevida de camundongos irradiados com raios gama. Supõe-se que a ligação de polissacarídeos às lectinas do viscum modula seu efeito e pode possivelmente levar a uma estabilização das lectinas no extrato do viscum [175, 191, 202]. 

Numerosos e diferentes derivados flavonóides podem ser detectados na planta viscum, em particular a quercetina e o éster metílico da quercetina, que estão predominantemente presentes na forma glicosilada. Eles induzem apoptose em vários modelos de cultura de células e exibem propriedades de eliminação [175, 191, 202].

Os extratos de viscum contêm uma alta concentração de tióis, como a glutationa, que também exibem boas propriedades de eliminação.

Além disso, a atividade da poli-ADP-ribose polimerase (PARP), a enzima-chave nos processos de reparo do DNA, é significativamente influenciada pelo conteúdo de tióis. O potencial antioxidante dessas substâncias pode contribuir para a eficácia geral do viscum [193].

Muito cedo, os triterpenos foram identificados como constituintes do viscum, mas não receberam atenção até o início do século XXI, quando suas propriedades antitumorais foram reconhecidas [192]. Entre os sete triterpenos identificados no viscum, o ácido oleanólico é o representante predominante com concentrações de até 3 por cento do peso seco. Efeitos antiproliferativos e indutores de apoptose foram demonstrados tanto para o ácido oleanólico quanto para outros triterpenos pentacíclicos isolados do viscum, como o ácido betulínico e o ácido ursólico [192, 197].

Em extratos aquosos de viscum, anteriormente disponíveis como produtos farmacêuticos, apenas pequenas quantidades de triterpenos podem ser detectadas. Existem, no entanto, novos desenvolvimentos farmacêuticos usando essas substâncias semelhantes a cola como uma pomada para o tratamento tópico de lesões. Eles foram descritos como sendo bem tolerados pela pele e tendo efeitos favoráveis no câncer de células basais, úlceras, queimaduras e um efeito promotor de granulação [210].